Veterinární laboratoř Fractal Bio

Anaplazmóza u koček a psů je přenosné onemocnění způsobené bakteriemi Anaplasma phagocytophilum (granulocytární anaplazmóza) a Anaplasma platys (infekční cyklická trombocytopenie) rodina Anaplasmataceae.

Kromě psů a koček Anaplasma phagocytophilum Byl také nalezen u lidí, skotu, malých přežvýkavců, hlodavců, jelenů, ptáků a dalších savců. Anaplasma platys byl popsán u divokých prasat, lišek, jelenů, velbloudů, skotu a lidí [1, s. 5–6; 2, s. 549].

Historické informace

Původce granulocytární anaplazmózy byl poprvé popsán Gordonem a kol. v roce 1940 ve Skotsku jako etiologický agens klíšťové horečky u ovcí a byl klasifikován jako RickettsiaPozději v roce 1951 byl patogen pojmenován Rickettsia phagocytophilaa v roce 1974 byl přejmenován Ehrlichia phagocytophilaV roce 2001 byla navržena reklasifikace rodu. Ehrlichia a skupinu patogenů včetně E. fagocytophila, E. equi a původce granulocytární ehrlichiózy u lidí byl pojmenován Anaplasma phagocytophilum [3, s. 1–2].

U psů byl tento patogen poprvé objeven v roce 1982 v Kalifornii. První případ infekce u koček byl popsán ve Švédsku v roce 1999 [1, s. 1; 4, s. 428].

Původce anaplazmózy krevních destiček (infekční cyklické trombocytopenie) byl poprvé popsán v roce 1978 u psů Harveyem a kol. v USA (Florida) jako organismus podobný rickettsii. Na základě morfologie a sérologických zkřížených reakcí s Ehrlichia canis V roce 1983 byl navržen název Ehrlichia platysPo překlasifikování v roce 2001 byl organismus pojmenován Anaplasma platys. DNA tohoto původce byla objevena u koček v Brazílii v roce 2010 [1, s. 1; 2, s. 542–549; 5, s. 1].

Anaplasma, která postihuje psy a kočky (rod Anaplasma, rodina Anaplasmataceae, objednat Rickettsiales) jsou intracelulární obligátní pleomorfní gramnegativní bakterie, které primárně postihují leukocyty (granulocyty) a krevní destičky a tvoří intraplazmatické bakteriální shluky – moruly [6, s. 903].

Mezi zástupci rodiny Anaplasmataceae Neexistuje zde buněčná stěna, vrstva peptidového glykanu ani lipopolysacharidy (LPS), což je činí závislými na cholesterolu hostitele, ale umožňuje patogenům pevně se vázat v buněčných inkluzích a také se vyhnout imunitní odpovědi hostitele (receptory exprimované neutrofily nebo makrofágy pro detekci patogenů, identifikující molekuly peptidového glykanu a LPS, v tomto případě nejsou detekovány) [2, s. 542; 7, s. 4].

Hlavní nositelé původce granulocytární anaplazmózy A. phagocytophilum jsou klíšťata rodu IxodesLarvy se nakazí krmením krví nakažených malých savců. Po zimě se z nich línají nymfy a živí se většími savci. Koncem léta až začátkem podzimu dochází k poslednímu svlékání na dospělého jedince, který se živí a páří na velkých savcích, načež samice kladou vajíčka na zem a uhynou. U klíšťat migrují anaplasmy ze středního střeva do slinných žláz a infikovat savce během krmení krví prostřednictvím slinných sekretůZachování patogenu ve všech fázích vývoje klíštěte je způsobeno transfázovým přenosem [2, s. 542–544; 8, s. 4–5].

pro A. platys Pravděpodobným nositelem je Rhipicephalus sanguineus U klíšťat tohoto druhu byla popsána přítomnost sl DNA patogenu, stejně jako jeho transfázový přenos, ale přenos na obratlovce nebyl experimentálně prokázán [2, s. 549].

Anaplazmy se vyznačují dvoufázovým biologickým cyklem se střídáním malé infekční formy s hustým jádrem (DC – buňky s hustým jádrem, 0,2–0,4 μm) a větší neinfekční binární replikující se retikulární buněčné formy (RC – retikulární buňky, 0,8–2 μm). DC formy se přichytí na povrch cílových buněk hostitele, proniknou jimi endocytózou a diferencují se na neinfekční RC uvnitř buněčné vakuoly, kde se binárně dělí a tvoří moruly (1,5–6 μm). Po několika dnech se bakterie rediferencují na DC a jsou uvolněny z buňky exocytózou nebo buněčnou lýzou, čímž se zahajuje nový infekční cyklus [2, s. 542; 9, s. 172; 10, s. 5; 14, s. 2; 16, s. 240].

epidemiologická data

Šíření patogenů přímo souvisí s geografickým rozšířením jejich přenašečů. Údaje o globálním rozšíření, typech přenašečů klíšťat a obratlovcích vnímavých k onemocnění jsou uvedeny níže v tabulce 1. Infekce je zaznamenávána v jarním a podzimním období, což je spojeno se sezónní aktivitou klíšťat. Hlavními rezervoáry pro A. phagocytophilum hlodavci a divocí přežvýkavci jsou hlavními. Potenciálními rezervoáry pro A. platys – lišky, jeleni, dobytek, divočáci, velbloudi [1, s. 4; 2, s. 542–543; 4, s. 428].

Tabulka 1. Údaje o rozšíření patogenů A. phagocytophilum a A. platys, jejich přenašečů a obratlovců náchylných k rozvoji onemocnění [2, s. 542]

Koně, hospodářská zvířata, kočky, psi, lidé, velbloudi

*Pravděpodobný přenašeč, experimentálního přenosu patogenu na zvíře se nepodařilo dosáhnout.

Hlavními dopravci v naší zemi jsou A. phagocytophilum jsou klíšťata Ixodes ricinus (západní část nosoareálu) a Ixodesper sulcatus (východní část nozoareálu) – evropská část Ruska, Ural, Sibiř a Dálný východ. Rhipicephalus sanguineus и A. platys – jihozápadní oblasti země [11; 12; 13].

Nebyla zaznamenána žádná predispozice k onemocnění na základě pohlaví, plemene ani věku. Přenos patogenu transfuzí je možný [1, s. 5–6; 4, s. 429]. Vertikální přenos byl prokázán. A. platys od fen k potomkům v první polovině těhotenství [2, s. 549].

Patogeneze a klinické příznaky

Nejčastější klinické projevy anaplazmózy u koček a psů nespecifické [1, str. 7].

A. phagocytophilum

Přenos A. phagocytophilum Přenos od nosiče ke zvířeti trvá 24–48 hodin, bakteriemie se rozvíjí 4–7 dní po kousnutí klíštětem. Inkubační doba je 7–14 dní. Po proniknutí do granulocytů patogeny inhibují jejich funkce, jako je fagocytóza, motilita, uvolňování aktivních kyslíkových radikálů, interakce s endotelovými buňkami a transmigrace neutrofilů do tkání, a také zpomalují jejich apoptózu. Infikovány mohou být buňky kostní dřeně, endotelové buňky a megakaryocyty [1, s. 6; 2, s. 544–545; 14, s. 8].

Závažnost onemocnění se pohybuje od subklinické po akutní. Přítomnost perzistence a chronických projevů je kontroverzní a může záviset na kmeni patogenu a imunitní odpovědi zvířete. Zvětšení lymfatických uzlin a splenomegalie se vyvíjejí v důsledku reaktivní lymfoidní hyperplazie a současné extramedulární hematopoézy ve slezině. Je pozorována trombocytopenie od mírné po těžkou, včetně imunitně zprostředkované. Kulhání může být pozorováno jako důsledek sekundární imunitně zprostředkované (neutrofilní) artritidy [1, s. 7; 2, s. 544–545; 14, s. 10].

Většina zvířat nevykazuje žádné klinické příznaky, u některých se rozvine samovolně odeznívající horečnatý stav. Kromě horečky se často pozoruje slabost, odmítání jídla, dehydratace, lymfadenomegalie, splenomegalie a tachypnoe. Dále se pozorují bledé sliznice, hepatomegalie, plicní zvuky, zvracení, průjem, bolesti břicha a končetin, kulhání, nechuť k pohybu, petechie, meléna, epistaxe, kolaps, mírný kašel, uveitida, injekce do bělima u psů a zánět spojivek u koček, polyurie/polydipsie, neurologické projevy a periferní edém. Na základě výsledků laboratorních testů je nejčastěji zaznamenána trombocytopenie., lymfopenie, lymfocytóza, anémie, neutrofilie, neutropenie, monocytopenie, monocytóza, eozinofilie, hypoalbuminémie, hyperglobulinemie, středně těžká bilirubinémie, zvýšená ALT a ALP, hypo-/hyperkalemie, hypo-/hypernatrémie, metabolická acidóza, neutrofilní zánět při vyšetření synoviální tekutiny, izostenurie, hyposthenurie, proteinurie a zvýšený poměr protein/kreatinin [1, s. 7-8; 2, s. 544-545; 4, s. 432-435].

Inkubační doba infekce A. platys Také po 7–14 dnech patogeny postihují krevní destičky, po kterých lze pozorovat cyklická období trombocytopenie (každé 1–2 týdny). Závažnost trombocytopenie a procento infikovaných krevních destiček jsou maximální během prvního cyklu. Trombocytopenie je na začátku onemocnění způsobena přímým mechanickým poškozením patogeny, ale následně hrají hlavní roli imunitně zprostředkované mechanismy. Podíl infikovaných krevních destiček prudce klesá s následnými parazitémiemi, ale epizody trombocytopenie zůstávají závažné. Chronická infekce je způsobena nízkou bakteriemií a mírnou trombocytopenií. Některé studie popsaly detekci patogenu v megakaryocytech [1, s. 7–9; 5, s. 1; 15, s. 449].

Klinický obraz u psů závisí na kmeni patogenu, přítomnosti souběžných infekcí a imunitní odpovědi zvířete. Často se pozoruje horečka, letargie, anorexie, úbytek hmotnosti, bledé sliznice, petechie, výtok z nosu, lymfadenopatie, méně často uveitida a epistaxe, splenomegalie, oční léze, hyphém, ekchymóza, dehydratace, muskuloskeletální poruchy a případně kožní léze. Podle výsledků laboratorních testů: trombocytopenie, neregenerativní anémie, hypoalbuminémie, hyperglobulinemie. U koček byla v ojedinělých případech mezi popsanými klinickými příznaky po detekci DNA patogenu zaznamenána trombocytopenie, u jednoho zvířete byla pozorována anorexie [1, s. 8; 2, s. 549–550].

Často popisováno koinfekce c Borrelia burgdorferi, Ehrlichia canis, Babesia spp., stejně jako s dalšími přenosnými patogeny [1; s. 7, 11].

diagnostika

Existuje několik laboratorních testů k dispozici pro diagnostiku anaplazmózy.

Mikroskopie – detekce morul při vyšetření krevního nátěru (obr. 1, 2). Moruly A. phagocytophilum byly detekovány v krvi 4. den po experimentální infekci a přetrvávaly 4–8 dní. Moruly A. platys byly detekovány 8.–15. den. Metoda má nízkou citlivost a neumožňuje diferenciaci A. phagocytophilum z Ehrlichia ewingii [1, s. 8–9; 2, s. 545–551].

Sérologické metody diagnostika pro detekci protilátek. Materiálem pro studii je krevní sérum. Během experimentální infekce se protilátky proti A. phagocytophilum byly zjištěny 8 dní po infekci, A. platys – po 16 dnech. Pro lepší interpretaci výsledků se doporučuje kombinovat s PCR.

Nevýhody sérologických metod:

— pozitivní výsledek naznačuje kontakt s patogenem, ale neposkytuje informace o aktivitě infekce;

– existuje zkřížená reaktivita mezi A. phagocytophilum и A. platys , méně často mezi A. phagocytophilum и E. canis , A. platys и E. canis ;

— v raných stádiích onemocnění jsou možné falešně negativní výsledky [1, s. 9–10; 2, s. 546–551].

Molekulární výzkumné metody – PCRJe to nejcitlivější a nejspecifičtější diagnostická metoda, která umožňuje identifikovat patogen před objevením morul v krevních nátěrech a detekcí protilátek. Materiály pro výzkum: žilní krev, leukocytární film, kostní dřeň, aspiráty sleziny a lymfatických uzlin. Detekce DNA patogenu by měla být považována za důkaz aktivní infekce. Biomateriál by měl být před použitím antibiotik vyšetřen pomocí PCR, aby se předešlo falešně negativním výsledkům [1, s. 9–10; 2, s. 546–551].

Obr. 1. Moruly A. platys v krevní destičce [1, s. 9]

Obr. 2. Moruly A. phagocytophilum v cytoplazmě neutrofilu [1, s. 9]

Křížová reaktivita v sérologických výzkumných metodách mezi A. phagocytophilum и A. platys, stejně jako použití PCR testovacích systémů bez diferenciace druhů může představovat problém pro diferenciální diagnózu v případě, že jsou oba patogeny přítomny ve stejné oblasti, ale léčba obou typů anaplazmózy je podobná [2, s. 547-551].

1. Sainz Á, Roura X, Miró G a kol. Pokyny pro veterinární lékaře k psí ehrlichióze a anaplasmóze v Evropě. Přenašeči parazitů. 2015;8:75. Publikováno 2015. února 4. doi:10.1186/s13071-015-0649-0

3. Stuen S, Granquist EG, Silaghi C. Anaplasma phagocytophilum – rozšířený patogen s více hostiteli a vysoce adaptivními strategiemi. Front Cell Infect Microbiol. 2013;3:31. Publikováno 2013. července 22. doi:10.3389/fcimb.2013.00031

4. Schäfer I, Kohn B. Infekce Anaplasma phagocytophilum u koček: Přehled literatury pro zvýšení klinického povědomí. J Feline Med Surg. 2020;22(5):428-441. doi:10.1177/1098612X20917600

5. Dyachenko V, Pantchev N, Balzer HJ, Meyersen A, Straubinger RK. První případ infekce Anaplasma platys u psa z Chorvatska. Přenašeči parazitů. 2012;5:49. Publikováno 2012. března 9. doi:10.1186/1756-3305-5-49

6. Vissotto de Paiva Diniz, P. P. (2020). Ehrlichióza a anaplazmóza. Klinická interní medicína malých zvířat, 903-912.

7. Torina A, Villari S, Blanda V a kol. Vrozená imunitní odpověď na patogeny přenášené klíšťaty: Buněčné a molekulární mechanismy indukované u hostitelů. Int J Mol Sci. 2020;21(15):5437. Publikováno 2020. července 30. doi:10.3390/ijms21155437

8. Alberdi P, Espinosa PJ, Cabezas-Cruz A, de la Fuente J. Anaplasma phagocytophilum manipuluje s apoptózou hostitelských buněk různými mechanismy za účelem vzniku infekce. Vet Sci. 2016;3(3):15. Publikováno 2016. července 15. doi:10.3390/vetsci3030015

9. Moumene A, Meyer DF. Molekulární triky Ehrlichií k manipulaci s jejich hostitelskými buňkami. Microbes Infect. 2016;18(3):172-179. doi:10.1016/j.micinf.2015.11.001

10. Colonne PM, Winchell CG, Voth DE. Únos buněčných dálnic: Manipulace aktinového cytoskeletu hostitele obligátními intracelulárními bakteriálními patogeny. Front Cell Infect Microbiol. 2016;6:107. Publikováno 2016. září 22. doi:10.3389/fcimb.2016.00107

11. Masuzawa T, Kharitonenkov IG, Okamoto Y, Fukui T, Ohashi N. Prevalence Anaplasma phagocytophilum a její koinfekce s Borrelia afzelii u klíšťat Ixodes ricinus a Ixodes persulcatus obývajících Tverskou oblast (Rusko) – sympatrickou oblast pro oba druhy klíšťat. J Med Microbiol. 2008;57(část 8):986-991. doi:10.1099/jmm.0.47721-0

12. Livanová NN, Fomenko NV, Akimov IA, et al. Průzkum psů v ruských veterinárních nemocnicích: identifikace klíšťat a molekulární detekce patogenů přenášených klíšťaty. Parazitní vektory. 2018;11(1):591. Publikováno 2018. listopadu 14 doi:10.1186/s13071-018-3161-5

13. Volgina Natalia Sergejevna, Oleynik Vera Vladimirovna, Zyryanova Alexandra Viktorovna, Pykhova Laura Sergeevna, Engashev Sergey Vladimirovich, & Prilepsky Yuri Olegovich (2022). VEKTOROVÉ ONEMOCNĚNÍ PSŮ V OBLASTI ČERNÉ MOŘI V RUSKU (SOCHI): NOVÁ DATA. Ruský veterinární časopis, (2), 5-16.

14. El Hamiani Khatat S, Daminet S, Duchateau L, Elhachimi L, Kachani M, Sahibi H. Epidemiologické a klinicko-patologické rysy infekce Anaplasma phagocytophilum u psů: Systematický přehled. Front Vet Sci. 2021;8:686644. Publikováno 2021. června 23. doi:10.3389/fvets.2021.686644

15. Baker DC, Simpson M, Gaunt SD, Corstvet RE. Akutní infekce Ehrlichia platys u psa. Vet Pathol. 1987;24(5):449-453. doi:10.1177/030098588702400513

16. Popov VL, Han VC, Chen SM a kol. Ultrastrukturální diferenciace genoskupin rodu Ehrlichia. J Med Microbiol. 1998;47(3):235-251. doi:10.1099/00222615-47-3-235

Můj pes byl diagnostikován s anaplazmózou. co to znamená?

Anaplazmóza je onemocnění přenášené klíšťaty způsobené infekčním bakteriálním organismem Anaplasma phagocytophilum. Přenáší se kousnutím klíštěte černonohého. Menší forma anaplazmózy je přenášena klíštětem hnědým. Je známo, že anaplazmóza se vyskytuje po celém světě u široké škály zvířat.

Jaké jsou klinické příznaky anaplazmózy?

Infekce běžnější formou anaplazmózy, Anaplasma phagocytophilum, často způsobuje kulhání, bolesti kloubů, horečku, letargii a nedostatek chuti k jídlu. Většina infikovaných psů vykazuje příznaky během 1-7 dnů, ale někteří vykazují jen málo nebo žádné příznaky. Méně časté klinické příznaky zahrnují zvracení, průjem, kašel a dýchací potíže. Neurologické příznaky, jako jsou záchvaty, jsou velmi vzácné.

Infekce často způsobuje kulhání, bolesti kloubů, horečku, letargii a nedostatek chuti k jídlu.

Infekce anaplazmózou může způsobit cyklickou trombocytopenii. Jedná se o stav, kdy dochází k periodickému úbytku krevních destiček (cirkulujících buněk, které napomáhají procesu srážení krve. Klinické příznaky onemocnění jsou obvykle mírné, ale u některých psů se mohou objevit modřiny nebo krvácení, zejména v časných stádiích onemocnění kdy může být počet krevních destiček na nejnižší úrovni.

Psi s anaplazmózou často vykazují stejné příznaky jako klíšťová borelióza (lymská borelióza) a infekce oběma původci (koinfekce) není neobvyklá. Obě nemoci se obvykle vyskytují ve stejné geografické lokalitě a jsou přenášeny stejným druhem klíštěte.

Jak se anaplazmóza diagnostikuje?

Existuje několik typů testů, včetně ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay), fluorescenční protilátky a polymerázové řetězové reakce (PCR), které pomáhají diagnostikovat anaplazmózu. Kromě toho mohou být organismy někdy pozorovány pod mikroskopem během vrcholných fází infekce.

Váš veterinář určí, který diagnostický protokol je pro vašeho psa vhodný.

Některé z těchto testů lze provést ve vaší veterinární nemocnici, zatímco jiné budou muset být provedeny ve specializované veterinární laboratoři. Váš veterinář s vámi probere různé možnosti testování a určí, který diagnostický protokol je pro vašeho psa nejlepší.

Jak se léčí a jaká je prognóza?

Léčba anaplazmózy u psů je stejná jako u jiných blízce příbuzných infekcí přenášených klíšťaty, včetně ehrlichiózy a lymské boreliózy: antibiotikum doxycyklin. Mnoho infikovaných psů podstoupí léčbu do 30 dnů. Ve většině případů symptomy rychle odezní během 24 až 48 hodin po zahájení léčby a prognóza klinického uzdravení je velmi příznivá.

Prognóza klinického uzdravení je velmi příznivá.

Ačkoli se zdraví většiny psů klinicky zlepšuje, může být obtížné určit, zda pes skutečně již není infikován. Pokud pes přestane produkovat protilátky v těle, může to znamenat, že se tělo zbavilo parazitů. I když se pes s anaplazmózou uzdraví, následné krevní testy mohou ukázat pozitivní výsledek na infekci. Neznamená to ale, že má pes aktivní infekci, a proto se nedoporučuje podávat druhou kúru antibiotiky pro dosažení negativních výsledků krevních testů.

Co když jsou testy pozitivní, ale pes není nemocný?

Psi z oblastí, kde je běžná anaplazmóza nebo lymská borelióza, jsou vystaveni Anaplasma phagocytophilum a mají pozitivní testy na protilátky. Výzkum naznačuje, že asi 40 % psů v těchto oblastech může být séropozitivních (test pozitivní). Zdá se však, že mnoho psů může mít protilátky proti anaplazmě bez jakýchkoli klinických příznaků onemocnění. Je také známo, že někteří klinicky zdraví psi mohou mít chronickou infekci Anaplasma phagocytophilum a být chronickými přenašeči parazita. Není známo, zda takoví psi nakonec onemocní nebo ne.

Současný výzkum naznačuje, že anaplazmóza se stává akutní jeden až dva týdny po infekci kousnutím klíštěte. Protože chronická infekce nebyla přímo spojena s klinickým onemocněním a protože účinek odstranění parazitů z infikovaného psa nebyl prokázán, léčba klinicky zdravých, séropozitivních zvířat má sporný přínos a v současné době se nedoporučuje.

Pozitivní výsledek testu u klinicky zdravého psa by neměl být ignorován.

Pozitivní výsledek testu u klinicky zdravého psa by však neměl být ignorován. Pes s pozitivním testem by měl minimálně podstoupit program kontroly klíšťat, aby se minimalizovala expozice klíšťatům. Je zřejmé, že koinfekce dvěma nebo více agens přenášenými klíšťaty je běžná a že u psů s kombinací různých infekcí je téměř dvakrát vyšší pravděpodobnost rozvoje klinického onemocnění než u psů infikovaných jediným agens.

Existuje také obava, že chronicky infikovaní přenašeči mohou být negativně ovlivněni léky, které potlačují imunitní systém (jako jsou steroidy) nebo nemocí, což může vést ke snížení imunitního stavu psa.

Mohu dostat anaplazmózu od psa?

Anaplasma phagocytophilum je považována za zoonotický patogen. To znamená, že má potenciál infikovat lidi. Přímý přenos ze zvířat na člověka nebo ze zvířete na zvíře je však velmi nepravděpodobný a takové případy nebyly zdokumentovány.

Pokud je u psa diagnostikována anaplazmóza, měla by být přijata přísná opatření proti klíšťatům.

Pokud je u psa diagnostikována anaplazmóza, znamená to, že někde v prostředí psa jsou infikovaná klíšťata, která mohou přenést infekci na lidi, proto by měla být okamžitě přijata opatření proti klíšťatům.